申請日2015.09.21
公開(公告)日2016.03.02
IPC分類號C12N1/20; C02F3/34
摘要
本發(fā)明公開一種處理高濃度有機廢水的菌株、微生物菌劑及其應用。具體包括戈登氏菌(Gordonia?sp.)Y-1(保藏登記號為CGMCC?NO.10791)和微桿菌(Microbacterium?sp.)Y-3(保藏登記號為CGMCC?NO.10792)，以及由戈登氏菌Y-1和微桿菌Y-3按照配比為1:1～3混合進行放大發(fā)酵，獲得濃度為1×109～1×1011CFU/mL菌劑。本發(fā)明的菌株Y-1、Y-3以及微生物菌劑能維持較強的有機物的降解能力，可用于高濃度有機廢水的污染物消減和降解處理領域。
權利要求書
1.一種戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1，其特征在于，所述的菌株保存登記號CGMCC NO.10791。
2.一種微桿菌(Microbacteriumsp.)Y-3，其特征在于，所述的菌株保藏登記號為 CGMCCNO.10792。
3.如權利要求1所述的戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1，其特征在于：所述菌株為革蘭氏陽性，氧化酶為陰性;菌落顏色為粉紅色圓形邊緣整齊光滑，菌株個體成桿狀狀，無芽孢，能運動。
4.如權利要求2所述的微桿菌(Microbacteriumsp.)Y-3，其特征在于：所述菌株為革蘭氏陽性，接觸酶陽性;菌落顏色為乳白色，圓形細小邊緣整齊光滑，菌株個體呈微桿狀，無芽孢，能運動。
5.一種微生物菌劑，其特征在于，該微生物菌劑由戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1(保藏登記號為CGMCCNO.10791)和微桿菌(Microbacteriumsp.)Y-3(保藏登記號為CGMCCNO.10792按照體積比為1:1～3混合進行放大發(fā)酵，獲得濃度為1× 109～1×1011CFU/mL菌劑。
6.權利要求5所述的微生物菌劑在高濃度有機廢水處理中的應用。
7.權利要求6所述的應用，其特征在于，所述的高濃度有機廢水為化工廢水、煉油或煉化廢水。
8.如權利要求5所述的微生物菌劑的制備方法，其特征在于：將所述戈登氏菌 (Gordoniasp.)Y-1和微桿菌(Microbacteriumsp.)Y-3分別接種于BPD液體培養(yǎng)基、30～35℃、150～240rpm好氧條件下震蕩培養(yǎng)1～3d至對數(shù)生長期，將獲得的戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1和微桿菌(Microbacteriumsp.)Y-3種子液混合，配比為1:1～3;
按體積百分比1%-10%的接種量將Y-1和Y-3混合種子液移至含有放大發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐進行發(fā)酵培養(yǎng)，條件為：罐溫為30～37℃，罐壓為0.03～0.06MPa，通氣量為0.8～1.5V/V/min，攪拌速度100～300rpm、發(fā)酵時間12～24h，使發(fā)酵液中濃度為1×109～1×1011CFU/mL;獲得的菌體加入常用保護劑后制備成液態(tài)菌劑，或者利用本領域的現(xiàn)有常規(guī)技術制成干粉狀菌劑;
所述放大發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖15～30g/L，KH2PO45～10.5g/L， (NH4)2HPO43～6g/L，檸檬酸0.9～1.84g/L，酵母膏9.3～19.5g/L，微量元素溶液5mL，消泡劑0.1%，蒸餾水1000ml，調節(jié)pH至6.8-7.2。
說明書
一種處理高濃度有機廢水的菌株、微生物菌劑及其應用
技術領域
本發(fā)明涉及一種處理高濃度有機廢水的菌株、微生物菌劑及其應用，屬于環(huán)境保護技術領域，也屬于生物強化技術的范疇。
背景技術
生物處理是目前廢水處理最常用的方法之一，具有應用范圍廣、適應性強及運行費用低等優(yōu)點。煉油、化工等行業(yè)均產(chǎn)生大量高濃度有機廢水，這類廢水不僅含有高濃度難降解有機污染物、成分復雜且含鹽量較高，這類廢水回收價值不高，若采用物理化學手段處理成本很高，因此對作為首選的生化處理工藝的高效、穩(wěn)定運行帶來極大的難度。
傳統(tǒng)生物處理工藝中的微生物對高濃度有機廢水中的復雜的難降解污染物的降解和耐受能力不高，處理效果不理想，而且系統(tǒng)受沖擊后恢復過程較長。
發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題在于，提供能夠處理高濃度有機廢水的高效菌株、由菌株制備的高效微生物菌劑，使得微生物菌劑具有活性強、抗沖擊能力高和處理徹底的優(yōu)點，能有效處理高濃度有機廢水。
為解決上述技術問題，本發(fā)明采用以下技術方案予以實現(xiàn)：
本發(fā)明對煉油和化工行業(yè)的污水處理設施中的混合污泥樣品，利用混合高濃度有機廢水進行馴化培養(yǎng)、篩選和分離后，獲得兩種高效菌株。
一種高效菌株是菌株Y-1，菌株Y-1經(jīng)過分子生物學鑒定為戈登氏菌屬(Gordoniasp.)，該菌株已于2015-5-11日保藏在中國普通微生物菌種保藏中心，地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏登記號為CGMCCNO.10791。該戈登氏菌Y-1菌落顏色為粉紅色;圓形邊緣整齊光滑，菌株個體成桿狀狀，無芽孢，能運動;革蘭氏染色為陽性，氧化酶為陰性，能利用多種碳源。
另一種高效菌株是Y-3菌株經(jīng)過分子生物學鑒定為微桿菌屬(Microbacteriumsp.)，該菌株已于2015-5-11日保藏在中國普通微生物菌種保藏中心，地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏登記號為CGMCCNO.10792。該微桿菌Y-3菌落顏色為乳白色，圓形細小邊緣整齊光滑，菌株個體呈微桿狀，無芽孢，能運動;革蘭氏染色為陽性，接觸酶陽性，能利用多種碳源。
本發(fā)明還提供了一種微生物菌劑，該微生物菌劑由戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1(保藏登記號為CGMCCNO.10791)和微桿菌(Microbacteriumsp.)Y-3(保藏登記號為CGMCCNO.10792)按照體積配比為1:1～3混合進行放大發(fā)酵獲得的濃度為1×109～1×1011CFU/mL菌劑。
本發(fā)明還提供了上述微生物菌劑在高濃度有機廢水處理中的應用，尤其在化工、煉油或煉化廢水中的應用。
進一步，本發(fā)明還提供了上述微生物菌劑的一種具體制備方法，包括以下內容：
1)將所述戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1和微桿菌(Microbacteriumsp.)Y-3分別接種于BPD液體培養(yǎng)基、30～35℃、150～240rpm好氧條件下震蕩培養(yǎng)1～3d至對數(shù)生長期，將獲得的戈登氏菌(Gordoniasp.)Y-1和微桿菌(Microbacteriumsp.)Y-3種子液混合，配比為1:1～3;
2)按體積百分比1%-10%的接種量將戈登氏菌Y-1和微桿菌Y-3混合種子液移至含有放大發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐進行發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：罐溫為30～37℃，罐壓為0.03～0.06MPa，通氣量為0.8～1.5V/V/min，攪拌速度100～300rpm、發(fā)酵時間12～24h，使發(fā)酵液中濃度為1×109～1×1011CFU/mL;獲得的菌體加入常用保護劑后制備成液態(tài)菌劑，或者利用本領域的現(xiàn)有常規(guī)技術制成干粉狀菌劑;
其中所述放大發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖15～30g/L，KH2PO45～10.5g/L，(NH4)2HPO43～6g/L，檸檬酸0.9～1.84g/L，酵母膏9.3～19.5g/L，微量元素溶液5mL，消泡劑0.1%，蒸餾水1000ml，調節(jié)pH至6.8-7.2。
本發(fā)明提供的高效菌株(戈登氏菌Y-1和微桿菌Y-3)能夠處理高濃度有機廢水的有機污染物。特別是由上述兩種菌株復配制得的微生物菌劑，其耐受的有機負荷高、抗沖擊能力強，可用于生化系統(tǒng)快速啟動、增效處理和沖擊后快速恢復，并可根據(jù)現(xiàn)場使用需要提供高活性液態(tài)菌劑或長期保存、便于運輸?shù)母煞蹱罹鷦�。該菌劑的制備方法具備操作簡單、使用方便、成本低廉的�?yōu)點，適合于規(guī)�；a(chǎn)和實際工程應用，可廣泛用于對煉油和化工等行業(yè)的高濃度有機廢水的生物處理。
