申請日2014.10.17

　　公開(公告)日2015.02.18

　　IPC分類號C12N1/04

　　摘要

　　本發(fā)明公開了一種污水處理用液態(tài)菌劑的保存方法。該保存方法主要有以下步驟：1)采用緩沖液調(diào)節(jié)液態(tài)菌劑的pH值至6-6.5;2)用氮?dú)馀懦�液態(tài)菌劑中的溶解氧;3)投加脫氧劑和菌抑制劑;4)以液體石蠟封面，并密封保存。采用本發(fā)明所述保存方法保存12個(gè)月后活菌量和降解活性分別可達(dá)到65%和75%以上。

　　權(quán)利要求書

　　1.一種污水處理用液態(tài)菌劑的保存方法，其特征在于，包括以下步驟：

　　1)采用緩沖液調(diào)節(jié)液態(tài)菌劑的pH至6-6.5;

　　2)用氮?dú)馀懦�液態(tài)菌劑中的溶解氧;

　　3)投加脫氧劑和菌抑制劑;

　　4)以液體石蠟封面，并于室溫條件下密封保存;

　　所述的緩沖液為濃度為0.05-0.1mol/L的磷酸鹽緩沖液或檸檬酸鹽緩沖液;

　　所述脫氧劑為抗壞血酸，所述菌抑制劑為山梨酸鉀，其中每千毫升液態(tài)菌劑中抗 壞血酸的投加量為0.5g-1g，山梨酸鉀投加量為2g-4g。

　　2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保存方法，其特征在于，用氮?dú)馀懦�液態(tài)菌劑中溶解氧采 用曝氮?dú)獾姆椒▽?shí)現(xiàn)，曝氣時(shí)間為10-30min。

　　3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保存方法，其特征在于，所述的液態(tài)菌劑選自降油菌、苯 酚降解菌、硝化菌和COD降解菌。

　　說明書

　　一種污水處理用液態(tài)菌劑的保存方法

　　技術(shù)領(lǐng)域

　　本發(fā)明屬于微生物水處理領(lǐng)域，具體涉及到污水處理領(lǐng)域所用功能菌種的保存 方法。

　　背景技術(shù)

　　當(dāng)前，我國環(huán)境污染仍然十分嚴(yán)峻，各種污染治理工藝與方法紛紛涌現(xiàn)，其中生 物處理法是主流技術(shù)手段，近年來以環(huán)境保護(hù)和污染防治為目的而研發(fā)的微生物菌劑 日趨增多，微生物菌劑的使用不僅可以大大縮短處理系統(tǒng)的啟動(dòng)時(shí)間與提高處理效 率，同時(shí)對難降解有毒污染物具有良好的降解效果，并可以提高處理系統(tǒng)的抗沖擊性 能。

　　但由于環(huán)境微生物菌劑是活菌制劑，因此其死亡快，不易保存;而污染凈化效果 直接與菌劑中的有效活菌數(shù)及其活性密切相關(guān)。因此，如何保證菌劑保存過程中的活 性和有效活菌數(shù)是菌劑應(yīng)用于污染治理的一項(xiàng)技術(shù)難題。

　　目前關(guān)于液態(tài)菌劑保存的研究仍以低溫、冷凍干燥等傳統(tǒng)保存技術(shù)為主，這些傳 統(tǒng)保存技術(shù)在工業(yè)化上無法實(shí)現(xiàn)對發(fā)酵菌劑的大規(guī)模保存。而現(xiàn)階段關(guān)于液態(tài)菌劑保 存技術(shù)的研究較少且效果較差，有研究對處理煉油廢水的微生物菌劑進(jìn)行常溫保存3 個(gè)月后其存活率只有60%左右，因此開發(fā)保存效率更高的液態(tài)菌劑室溫保存技術(shù)定將 成為今后研究的重點(diǎn)。

　　發(fā)明內(nèi)容

　　針對現(xiàn)有的傳統(tǒng)微生物保存技術(shù)無法對菌劑實(shí)現(xiàn)規(guī)模化保存的弊端，同時(shí)現(xiàn)階 段關(guān)于液態(tài)菌劑室溫保存技術(shù)的研究較少，本發(fā)明提供一種操作方便、保存量大、保 存后菌活性高、成本低廉的液態(tài)菌劑保存方法，從而為液態(tài)菌劑的商品化與工業(yè)化應(yīng) 用提供必要的技術(shù)支持。

　　為實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

　　一種污水處理用液態(tài)菌劑的保存方法，包括以下過程：1)采用緩沖液調(diào)節(jié)液態(tài) 菌劑的pH至6-6.5;2)通氮?dú)馀懦�液態(tài)菌劑中的溶解氧;3)投加脫氧劑和菌抑制劑; 4)以液體石蠟封面，并于室溫條件下密封保存;

　　所述的緩沖液為濃度為0.05-0.1mol/L的磷酸鹽緩沖液或檸檬酸鹽緩沖液;

　　所述脫氧劑為抗壞血酸，所述菌抑制劑為山梨酸鉀，其中每千毫升液態(tài)菌劑中抗 壞血酸的投加量為0.5g-1g，山梨酸鉀投加量為2g-4g。

　　在本發(fā)明所述的保存方法，其中用氮?dú)馀懦�液態(tài)菌劑中溶解氧優(yōu)選采用曝氮?dú)獾?方法實(shí)現(xiàn)，曝氣時(shí)間優(yōu)選為10-30min。

　　在本發(fā)明所述的保存方法，其中所述液態(tài)菌劑液體石蠟用量以剛鋪滿液面為止。

　　在本發(fā)明所述的保存方法，其中所述的液態(tài)菌劑包括降油菌、苯酚降解菌、硝化 菌和COD降解菌。

　　本發(fā)明的主要思路是通過緩沖液調(diào)整使菌劑始終保存穩(wěn)定的pH環(huán)境，且該pH 時(shí)本發(fā)明所述菌種抑制劑效果最好;通過曝氮?dú)夥绞匠�去液態(tài)菌劑中的溶解氧，更有 利于抑制菌劑生長，實(shí)現(xiàn)菌劑的長期保存;脫氧劑的添加和液體石蠟封面可以更好的 防止長期保存過程中空氣的進(jìn)入，以達(dá)到長期有效的保存效果。

　　本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下突出優(yōu)點(diǎn)和有益效果：

　　1、相對低溫、冷凍干燥等傳統(tǒng)保存方法，本發(fā)明所述的液態(tài)菌劑保存方法具有 經(jīng)濟(jì)高效、保存方法簡便、保存后菌種活性高等優(yōu)勢。

　　2、本發(fā)明所述液態(tài)菌劑保存方法采用簡單的物理和化學(xué)作用實(shí)現(xiàn)對菌種活性的 抑制、且在室溫條件下即可實(shí)現(xiàn)對菌種的長期保存，大大減化了操作流程和保存成本。

　　3、本發(fā)明所述的液態(tài)菌劑保存方法以實(shí)現(xiàn)對污水處理領(lǐng)域多種功能菌(降油菌、 苯酚降解菌、硝化菌、COD降解菌等)的保存，且保存后菌活性高，對實(shí)際廢水仍 有較好的處理效果。

　　具體實(shí)施方式

　　實(shí)施例1：

　　市售的含油廢水降解菌(本實(shí)施例采用碧沃豐生物科技有限公司的OBT除油菌) 保存前后對含油廢水的降解情況。

　　通過發(fā)酵罐對含油廢水降解菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，制備含油廢水降解菌液10L(菌 量:2.5×109cfu/ml，采用平板計(jì)數(shù)法，下同)，分二批用5L方形小口塑料桶進(jìn)行保存。 使用本發(fā)明所述保存技術(shù)對含油廢水降解菌液保存步驟如下：用0.05mol/L磷酸鹽緩 沖液調(diào)整菌液pH值為6，向塑料桶內(nèi)通入氮?dú)馄貧?0min，按0.5‰和2‰(m/v)比 例分別加入抗壞血酸和山梨酸鉀，以液體石蠟封面后于室溫條件下密封保存。

　　通過上述方法保存后菌液在保存6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)分別打開一批保存菌液計(jì)數(shù)， 并與新培養(yǎng)的含油廢水降解菌進(jìn)行對比降油實(shí)驗(yàn)，降油過程中控制菌量(107cfu/ml) 和初始含油濃度(60mg/L)一致，進(jìn)行相同時(shí)間(72h)的降解實(shí)驗(yàn)并對比降解效果。

　　結(jié)果表明：保存6個(gè)月后菌存活率為80%，72h含油廢水去油率為89.2%，此時(shí) 新培養(yǎng)菌液去油率為95.4%;保存12個(gè)月后菌存活率為68%，72h含油廢水去油率 為76.4%，此時(shí)新培養(yǎng)菌液去油率為92.9%。由此可見采用本發(fā)明所述保存技術(shù)對降 油菌保存6個(gè)月和12個(gè)月后菌液仍保持較高的存活率和降解活性。

　　實(shí)施例2

　　市售(本實(shí)施例采用碧沃豐生物科技有限公司的OBT裂解菌)苯酚降解菌保存 前后對苯酚降解活性的比較。

　　通過發(fā)酵罐對苯酚降解菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，制備菌液10L(菌量:3.2×109cfu/ml)， 分二批用5L方形小口塑料桶進(jìn)行保存。使用本發(fā)明所述保存技術(shù)對苯酚降解菌液保 存步驟如下：用0.07mol/L檸檬酸鹽緩沖液調(diào)整菌液pH為6.2，向塑料桶內(nèi)通入氮?dú)?20min，按0.8‰和3‰比例分別加入抗壞血酸和山梨酸鉀，以液體石蠟封面并于室溫 條件下密封保存。

　　通過上述方法保存后菌液在保存6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)分別打開一批保存菌液計(jì)數(shù)， 并與新培養(yǎng)的苯酚降解菌進(jìn)行對比降解實(shí)驗(yàn)，降解過程中控制菌量(107cfu/ml)和 廢水中初始苯酚濃度(以COD計(jì)為600mg/L)一致，進(jìn)行相同時(shí)間(48h)的降解實(shí) 驗(yàn)并對比降解效果。

　　結(jié)果表明：保存6個(gè)月后菌存活率為81.3%，48h苯酚去除率為90.8%，此時(shí)新 培養(yǎng)菌液去除率為96.4%;保存12個(gè)月后菌存活率為68.8%，48h苯酚去除率為 82.3%，此時(shí)新培養(yǎng)菌液去除率為95.7%。由此可見采用本發(fā)明所述保存技術(shù)對苯酚 降解菌保存6個(gè)月和12個(gè)月后菌液仍保持較高的存活率和降解活性。

　　實(shí)施例3：

　　市售硝化菌(本實(shí)施例采用碧沃豐生物科技有限公司的BZT硝化菌)保存前后 對氨氮降解情況。

　　將硝化菌配成10L菌液(菌量2.6×109cfu/ml)，分二批用5L方形小口塑料桶進(jìn) 行保存。使用本發(fā)明所述保存技術(shù)對硝化菌保存步驟如下：用0.1mol/L檸檬酸鹽緩 沖液調(diào)整菌液pH為6.5，向塑料桶內(nèi)通入氮?dú)?0min，按1‰和4‰比例分別加入抗 壞血酸和山梨酸鉀，以液體石蠟封面并于室溫條件下密封保存。

　　通過上述方法保存后菌液在保存6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)分別打開一批保存菌液計(jì)數(shù)， 并與新配制的硝化菌進(jìn)行對比降解實(shí)驗(yàn)，過程中控制菌量(107cfu/ml)和初始氨氮 濃度(60mg/L)一致，進(jìn)行相同時(shí)間(48h)的降解實(shí)驗(yàn)并對比降解效果。

　　結(jié)果表明：保存6個(gè)月后菌存活率為80.7%，48h氨氮去除率為86.8%，此時(shí) 新配制菌液去除率為94.4%;保存12個(gè)月后菌存活率為69.2%，48h氨氮去除率為 76.9%，此時(shí)新配制菌液去除率為93.1%。由此可見采用本發(fā)明所述保存技術(shù)對硝化 菌保存6個(gè)月和12個(gè)月后菌液仍保持較高的存活率和降解活性。

　　實(shí)施例4

　　市售COD降解菌(本實(shí)施例采用碧沃豐生物科技有限公司的COD去除菌)保 存前后對COD降解情況。

　　通過發(fā)酵罐對COD降解菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，制備COD降解菌液10L(菌量4.7×109cfu/ml)，分二批用5L方形小口塑料桶進(jìn)行保存。使用本發(fā)明所述保存技術(shù)對菌液保 存步驟如下：用0.08mol/L磷酸鹽緩沖液調(diào)整菌液pH為6.3，向塑料桶內(nèi)通入氮?dú)?5 min，按0.6‰和2‰比例分別加入抗壞血酸和山梨酸鉀，以液體石蠟封面并于室溫條 件下密封保存。

　　通過上述方法保存后菌液在保存6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)分別打開一批保存菌液計(jì)數(shù)， 并與新培養(yǎng)的COD解菌進(jìn)行對比COD降解實(shí)驗(yàn)，過程中控制菌量(107cfu/ml)和初 始COD(1000mg/L)一致，進(jìn)行相同時(shí)間(24h)的降解實(shí)驗(yàn)并對比降解效果。

　　結(jié)果表明：保存6個(gè)月后菌存活率為78.7%，24h時(shí)COD去除率為90.1%，此 時(shí)新培養(yǎng)菌液COD去除率為96.4%;保存12個(gè)月后菌存活率為70.2%，24h時(shí)COD 去除率為84.5%，此時(shí)新培養(yǎng)菌液COD去除率為94.5%。由此可見采用本發(fā)明所述 保存技術(shù)對COD降解菌保存6個(gè)月和12個(gè)月后菌液仍保持較高的存活率和降解活 性。