申請(qǐng)日2015.09.08
公開(kāi)(公告)日2015.11.18
IPC分類號(hào)C12N1/00; C02F3/34
摘要
一種煤焦化廢水COD降解用菌種馴化試劑盒及馴化方法，試劑盒包括富集管、馴化預(yù)制管A、馴化預(yù)制管B，馴化方法包括缺氧和好氧馴化。該試劑盒是通過(guò)在全國(guó)大量采集煤焦化廢水樣品，對(duì)廢水成分進(jìn)行分析，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)配制出了一種可以模擬真實(shí)污水的馴化培養(yǎng)基，并以此為基礎(chǔ)形成了試劑盒。該馴化培養(yǎng)基具有較強(qiáng)的適應(yīng)性，通過(guò)其馴化后的菌種投入到多個(gè)煤焦化污水樣品后，其COD降解能力均有所提高，大大縮短污水處理啟動(dòng)時(shí)間。該試劑盒可模擬缺氧、好氧生物法工藝，可應(yīng)用于煤焦化污水處理菌劑的產(chǎn)品優(yōu)化，以及污水廠在運(yùn)行前對(duì)污泥進(jìn)行快速馴化。
摘要附圖
權(quán)利要求書(shū)
1.一種煤焦化廢水COD降解用菌種馴化試劑盒，其特征在于：它是由富集 管、馴化預(yù)制管A、馴化預(yù)制管B組成;其中：
(一)、富集管：
富集管的制備：
(1)、取牛肉膏1-2g，蛋白胨1-2g，磷酸二氫鉀640-780mg，磷酸氫二鈉 0.75-1.25g，用1L水溶解，以上培養(yǎng)基用濃度5%的碳酸鈉和5%HCl調(diào)pH至 7.00-7.50，分裝到50ml螺口管中，每支管加入培養(yǎng)基20ml;分裝完畢后，將 螺口管蓋擰松，115℃滅菌25-30min，待滅菌結(jié)束并冷卻至室溫后，從滅菌鍋中 取出并擰緊管蓋，至此基礎(chǔ)富集管制備完成;
(2)、取苯酚18-22mg，萘酚3-7mg，2-甲基苯酚3-7mg，3-甲基苯酚3-7mg， 喹啉1-2mg，用100ml無(wú)菌水溶解，溶解后在無(wú)菌條件下用0.22μm無(wú)菌濾膜過(guò) 濾除菌;過(guò)濾除菌完成后，取2ml經(jīng)過(guò)過(guò)濾除菌的溶液，在無(wú)菌條件下加入到 步驟(1)中的基礎(chǔ)富集管中，至此富集管制備完成;
(二)、馴化預(yù)制管A：
馴化預(yù)制管A的制備：
(1)、取牛肉膏0.8-1.2g，蛋白胨0.8-1.2g，丙三醇0.2-0.4ml，磷酸二 氫鉀640-780mg，磷酸氫二鈉0.75-1.25g，用1L水溶解，以上培養(yǎng)基用濃度5% 的碳酸鈉和5%HCl調(diào)pH至7.50-8.00，分裝到50ml螺口管中，每支管加入培養(yǎng) 基30ml;分裝完畢后，將螺口管蓋擰松，115℃滅菌25-30min，待滅菌結(jié)束并冷 卻至室溫后，從滅菌鍋中取出并擰緊管蓋，至此基礎(chǔ)馴化預(yù)制管A制備完成;
(2)、取苯酚23-27mg，萘酚8-12mg，2-甲基苯酚8-12mg，3-甲基苯酚 8-12mg，喹啉2-4mg，苯胺4-6mg，吡啶0.4-0.6mg，間甲苯胺4-6mg，辛基十 二烷醇0.1-0.2mg，用100ml無(wú)菌水溶解，溶解后在無(wú)菌條件下用0.22μm無(wú)菌 濾膜過(guò)濾除菌，過(guò)濾除菌后的溶液為水添加物A;
(3)、取萘130-170mg，吲哚230-270mg，甲苯3-7mg，鄰苯二甲酸二丁酯 2-3mg，苯并咪唑2-3mg，用100ml75%乙醇溶解，此溶液為醇添加物A;
(4)、分別取水添加物A3ml，醇添加物A0.012ml，在無(wú)菌條件下裝到步 驟(1)中的基礎(chǔ)馴化預(yù)制管A中，至此馴化預(yù)制管A制備完成;
(三)、馴化預(yù)制管B：
馴化預(yù)制管B的制備：
(1)、取牛肉膏0.5-0.7g，蛋白胨0.5-0.7g，丙三醇0.6-0.8ml，磷酸二 氫鉀640-780mg，磷酸氫二鈉0.75-1.25g，用1L水溶解，以上培養(yǎng)基用濃度5% 的碳酸鈉和5%HCl調(diào)pH至7.50-8.00，分裝到50ml螺口管中，每支管加入培養(yǎng) 基30ml;分裝完畢后，將螺口管蓋擰松，115℃滅菌25-30min，待滅菌結(jié)束并冷 卻至室溫后，從滅菌鍋中取出并擰緊管蓋，至此基礎(chǔ)馴化預(yù)制管B制備完成;
(2)、取苯酚150-200mg，萘酚20-25mg，2-甲基苯酚40-50mg，3-甲基苯 酚40-50mg，喹啉8-10mg，苯胺10-15mg，吡啶0.8-0.9mg，間甲苯胺10-15mg， 辛基十二烷醇0.3-0.4mg，用100ml無(wú)菌水溶解，溶解后在無(wú)菌條件下用0.22 μm無(wú)菌濾膜過(guò)濾除菌，過(guò)濾除菌后的溶液為水添加物B;
(3)、取萘740-760mg，吲哚1200-1300mg，甲苯20-25mg，鄰苯二甲酸二 丁酯10-14mg，苯并咪唑10-14mg，用100ml75%乙醇溶解，此溶液為醇添加物B;
(4)、分別取水添加物B3ml，醇添加物B0.012ml，在無(wú)菌條件下裝到步 驟(1)中的基礎(chǔ)馴化預(yù)制管B中，至此馴化預(yù)制管B制備完成。
2.一種采用權(quán)利要求1所述的煤焦化廢水COD降解用菌種馴化試劑盒馴化 方法，其特征在于：包括以下步驟：
(一)、缺氧階段馴化：
(1)、將待馴化樣品取1-3ml接種到第1富集管中，將第1富集管的管蓋擰 緊，平放入搖床28-35℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48小時(shí);
(2)、取經(jīng)第1富集管培養(yǎng)的樣品5ml，接種到第1馴化預(yù)制管A中，將第 1富集管連同管內(nèi)剩余樣品放入4℃冷藏;
(3)、將第1馴化預(yù)制管A的管蓋擰緊，平放入搖床25-30℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)24-48小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液A130ml放入100ml 經(jīng)過(guò)滅菌的第1三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第2馴化預(yù) 制管A中繼續(xù)培養(yǎng);
(4)將第2馴化預(yù)制管A的管蓋擰緊，平放入搖床25-30℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)24-48小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液A230ml放入100ml 經(jīng)過(guò)滅菌的第2三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第3馴化預(yù) 制管A中繼續(xù)培養(yǎng);
(5)將第3馴化預(yù)制管A的管蓋擰緊，平放入搖床25-30℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)24-48小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液A330ml放入100ml 經(jīng)過(guò)滅菌的第3三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第1馴化預(yù) 制管B中繼續(xù)培養(yǎng);
(6)、將第1馴化預(yù)制管B的管蓋擰緊，平放入搖床25-28℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)48-72h;培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液B130ml放入100mi經(jīng) 過(guò)滅菌的第4三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第2馴化預(yù)制 管B中繼續(xù)培養(yǎng);
(7)、將第2馴化預(yù)制管B的管蓋擰緊，平放入搖床25-28℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)48-72h;培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液B230ml放入100ml經(jīng) 過(guò)滅菌的第5三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第3馴化預(yù)制 管B中繼續(xù)培養(yǎng);
(8)、將第3馴化預(yù)制管B的管蓋擰緊，平放入搖床25-28℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)48-72h;培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液B330ml放入100ml經(jīng) 過(guò)滅菌的第6三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀1ml，接種到第2富集管中， 將第2富集管的管蓋擰緊，平放入搖床28-35℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48 小時(shí);培養(yǎng)后將第2富集管放入4℃保存，或加入4ml無(wú)菌甘油，混勻后分裝到 凍存管凍存;此馴化后菌種為缺氧馴化菌種;
(二)、好氧階段馴化：
(9)、當(dāng)樣品經(jīng)過(guò)步驟(5)的第3馴化預(yù)制管A培養(yǎng)完成后，將步驟(2) 冷藏的第1富集管取出并恢復(fù)室溫;待恢復(fù)室溫6-10h后，取5ml接種到上清 液A3中;將接種后的上清液A3放入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 A2中繼續(xù)培養(yǎng);
(10)將接種后的上清液A2放入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 A1中繼續(xù)培養(yǎng);
(11)將接種后的上清液A1放入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 B3中;
(12)、將接種后的上清液B3入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)48-72 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 B2中繼續(xù)培養(yǎng);
(13)、將接種后的上清液B2入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)48-72 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 B1中繼續(xù)培養(yǎng);
(14)、將接種后的上清液B1入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)48-72 小時(shí)，培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀1ml，接種到第3 富集管中;
(15)、將第3富集管的管蓋擰緊，平放入搖床28-35℃、150-200rpm震蕩 培養(yǎng)24-48小時(shí);培養(yǎng)后將第3富集管放入4℃保存，或加入4ml無(wú)菌甘油，混 勻后分裝到凍存管凍存;此馴化后菌種為好氧馴化菌種。
說(shuō)明書(shū)
煤焦化廢水COD降解用菌種馴化試劑盒及馴化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一種菌種馴化試劑盒及馴化方法，特別涉及一種用于降解煤焦化 廢水COD用菌種馴化試劑盒及馴化方法。
背景技術(shù)：
煤焦化又稱煤炭高溫干餾。以煤為原料，在隔絕空氣條件下，加熱到950℃ 左右，經(jīng)高溫干餾生產(chǎn)焦炭，同時(shí)獲得煤氣、煤焦油并回收其它化工產(chǎn)品的一種 煤轉(zhuǎn)化工藝。
煤焦化行業(yè)造成的水污染相當(dāng)嚴(yán)重。我國(guó)煤炭?jī)?chǔ)量大，煤焦化廢水排放量大， 其廢水的成分相當(dāng)復(fù)雜，排出的廢水中含有大量難以降解的有機(jī)污染物，據(jù)相關(guān) 統(tǒng)計(jì)顯示，煤焦化廢水含有高達(dá)300多種污染物質(zhì)，不論是對(duì)環(huán)境還是對(duì)人類本 身都有著較大的影響。
煤焦化企業(yè)排放廢水含有大量有毒、有害物質(zhì)。綜合廢水中COD一般在5000 mg/L左右，廢水所含有機(jī)污染物包括酚類、多環(huán)芳香族化合物及含氮、氧、硫 的雜環(huán)化合物等。廢水中的易降解有機(jī)物主要是酚類化合物和苯類化合物;可降 解類有機(jī)物有砒咯、萘、呋喃、咪唑;難降解的有機(jī)物主要有吡啶、咔唑、聯(lián)苯、 三聯(lián)苯等。
目前國(guó)內(nèi)處理煤焦化廢水的主要工藝路線基本遵行“預(yù)處理+生化處理+ 深度處理”，其中生化處理是污水處理工藝的重要階段。通過(guò)對(duì)國(guó)內(nèi)多個(gè)煤焦化 企業(yè)的實(shí)地走訪，目前對(duì)于預(yù)處理后的煤焦化廢水，一般采用缺氧、好氧生物法 處理(A/O工藝)。微生物是廢水生物處理過(guò)程的核心，制約著污水處理的效果。 在污水廠啟動(dòng)初期或運(yùn)行受到?jīng)_擊需要重新恢復(fù)運(yùn)行時(shí)，國(guó)內(nèi)普遍采用的方法是 向污水處理設(shè)施中投加污泥和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，或者投加市場(chǎng)上現(xiàn)有的專用微生物菌 劑，達(dá)到污水處理設(shè)施正常運(yùn)行的目的。對(duì)于煤焦化廢水的處理，投加污泥和菌 劑的效果受到以下幾方面問(wèn)題的制約：一、煤焦化廢水中含有多種對(duì)微生物有毒 害作用的物質(zhì)，投加到污水中的污泥或菌種中的部分微生物容易被廢水中的毒性 物質(zhì)所抑制，為解決此問(wèn)題往往需要對(duì)污泥或菌種在投加前進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的馴化; 二、煤焦化廢水中有大量難降解有機(jī)物，這些物質(zhì)很難被微生物利用并降解，解 決這個(gè)問(wèn)題通常需要工藝的合理設(shè)計(jì)與污泥或菌劑的馴化共同解決;三、與普通 污水相比，煤焦化廢水處理設(shè)施的啟動(dòng)時(shí)間更長(zhǎng)，需要更長(zhǎng)時(shí)間的馴化。
發(fā)明內(nèi)容：
本發(fā)明的目的在于解決以上問(wèn)題，提供一種煤焦化廢水COD降解用菌種馴化 試劑盒及馴化方法，經(jīng)本試劑盒馴化后的菌種投放到煤焦化廢水中，可以大大縮 短污水處理啟動(dòng)時(shí)間，提高COD降解效率。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種煤焦化廢水COD降解用菌種 馴化試劑盒，其特征在于：它是由富集管、馴化預(yù)制管A、馴化預(yù)制管B組成; 其中：
(一)、富集管：
富集管的制備：
(1)、取牛肉膏1-2g，蛋白胨1-2g，磷酸二氫鉀640-780mg，磷酸氫二鈉 0.75-1.25g，用1L水溶解，以上培養(yǎng)基用濃度5%的碳酸鈉和5%HCl調(diào)pH至 7.00-7.50，分裝到50ml螺口管中，每支管加入培養(yǎng)基20ml;分裝完畢后，將 螺口管蓋擰松，115℃滅菌25-30min，待滅菌結(jié)束并冷卻至室溫后，從滅菌鍋中 取出并擰緊管蓋，至此基礎(chǔ)富集管制備完成;
(2)、取苯酚18-22mg，萘酚3-7mg，2-甲基苯酚3-7mg，3-甲基苯酚3-7mg， 喹啉1-2mg，用100ml無(wú)菌水溶解，溶解后在無(wú)菌條件下用0.22μm無(wú)菌濾膜過(guò) 濾除菌;過(guò)濾除菌完成后，取2ml經(jīng)過(guò)過(guò)濾除菌的溶液，在無(wú)菌條件下加入到 步驟(1)中的基礎(chǔ)富集管中，至此富集管制備完成;
(二)、馴化預(yù)制管A：
馴化預(yù)制管A的制備：
(1)、取牛肉膏0.8-1.2g，蛋白胨0.8-1.2g，丙三醇0.2-0.4ml，磷酸二 氫鉀640-780mg，磷酸氫二鈉0.75-1.25g，用1L水溶解，以上培養(yǎng)基用濃度5% 的碳酸鈉和5%HCl調(diào)pH至7.50-8.00，分裝到50ml螺口管中，每支管加入培養(yǎng) 基30ml;分裝完畢后，將螺口管蓋擰松，115℃滅菌25-30min，待滅菌結(jié)束并冷 卻至室溫后，從滅菌鍋中取出并擰緊管蓋，至此基礎(chǔ)馴化預(yù)制管A制備完成;
(2)、取苯酚23-27mg，萘酚8-12mg，2-甲基苯酚8-12mg，3-甲基苯酚 8-12mg，喹啉2-4mg，苯胺4-6mg，吡啶0.4-0.6mg，間甲苯胺4-6mg，辛基十 二烷醇0.1-0.2mg，用100ml無(wú)菌水溶解，溶解后在無(wú)菌條件下用0.22μm無(wú)菌 濾膜過(guò)濾除菌，過(guò)濾除菌后的溶液為水添加物A;
(3)、取萘130-170mg，吲哚230-270mg，甲苯3-7mg，鄰苯二甲酸二丁酯 2-3mg，苯并咪唑2-3mg，用100ml75%乙醇溶解，此溶液為醇添加物A;
(4)、分別取水添加物A3ml，醇添加物A0.012ml，在無(wú)菌條件下裝到步 驟(1)中的基礎(chǔ)馴化預(yù)制管A中，至此馴化預(yù)制管A制備完成;
(三)、馴化預(yù)制管B：
馴化預(yù)制管B的制備：
(1)、取牛肉膏0.5-0.7g，蛋白胨0.5-0.7g，丙三醇0.6-0.8ml，磷酸二 氫鉀640-780mg，磷酸氫二鈉0.75-1.25g，用1L水溶解，以上培養(yǎng)基用濃度5% 的碳酸鈉和5%HCl調(diào)pH至7.50-8.00，分裝到50ml螺口管中，每支管加入培養(yǎng) 基30ml;分裝完畢后，將螺口管蓋擰松，115℃滅菌25-30min，待滅菌結(jié)束并冷 卻至室溫后，從滅菌鍋中取出并擰緊管蓋，至此基礎(chǔ)馴化預(yù)制管B制備完成;
(2)、取苯酚150-200mg，萘酚20-25mg，2-甲基苯酚40-50mg，3-甲基苯 酚40-50mg，喹啉8-10mg，苯胺10-15mg，吡啶0.8-0.9mg，間甲苯胺10-15mg， 辛基十二烷醇0.3-0.4mg，用100ml無(wú)菌水溶解，溶解后在無(wú)菌條件下用0.22 μm無(wú)菌濾膜過(guò)濾除菌，過(guò)濾除菌后的溶液為水添加物B;
(3)、取萘740-760mg，吲哚1200-1300mg，甲苯20-25mg，鄰苯二甲酸二 丁酯10-14mg，苯并咪唑10-14mg，用100ml75%乙醇溶解，此溶液為醇添加物B;
(4)、分別取水添加物B3ml，醇添加物B0.012ml，在無(wú)菌條件下裝到步 驟(1)中的基礎(chǔ)馴化預(yù)制管B中，至此馴化預(yù)制管B制備完成。
一種采用煤焦化廢水COD降解用菌種馴化試劑盒馴化方法，其特征在于：包 括以下步驟：
(一)、缺氧階段馴化：
(1)、將待馴化樣品取1-3ml接種到第1富集管中，將第1富集管的管蓋擰 緊，平放入搖床28-35℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48小時(shí);
(2)、取經(jīng)第1富集管培養(yǎng)的樣品5ml，接種到第1馴化預(yù)制管A中，將第 1富集管連同管內(nèi)剩余樣品放入4℃冷藏;
(3)、將第1馴化預(yù)制管A的管蓋擰緊，平放入搖床25-30℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)24-48小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液A130ml放入100ml 經(jīng)過(guò)滅菌的第1三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第2馴化預(yù) 制管A中繼續(xù)培養(yǎng);
(4)將第2馴化預(yù)制管A的管蓋擰緊，平放入搖床25-30℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)24-48小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液A230ml放入100ml 經(jīng)過(guò)滅菌的第2三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第3馴化預(yù) 制管A中繼續(xù)培養(yǎng);
(5)將第3馴化預(yù)制管A的管蓋擰緊，平放入搖床25-30℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)24-48小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液A330ml放入100ml 經(jīng)過(guò)滅菌的第3三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第1馴化預(yù) 制管B中繼續(xù)培養(yǎng);
(6)、將第1馴化預(yù)制管B的管蓋擰緊，平放入搖床25-28℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)48-72h;培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液B130ml放入100ml經(jīng) 過(guò)滅菌的第4三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第2馴化預(yù)制 管B中繼續(xù)培養(yǎng);
(7)、將第2馴化預(yù)制管B的管蓋擰緊，平放入搖床25-28℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)48-72h;培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液B230ml放入100ml經(jīng) 過(guò)滅菌的第5三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀5ml接種到第3馴化預(yù)制 管B中繼續(xù)培養(yǎng);
(8)、將第3馴化預(yù)制管B的管蓋擰緊，平放入搖床25-28℃、100-150rpm 震蕩培養(yǎng)48-72h;培養(yǎng)完成后靜置30-60min，取上清液B330ml放入100ml經(jīng) 過(guò)滅菌的第6三角瓶中，然后放入4℃留存;取沉淀1ml，接種到第2富集管中， 將第2富集管的管蓋擰緊，平放入搖床28-35℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48 小時(shí);培養(yǎng)后將第2富集管放入4℃保存，或加入4ml無(wú)菌甘油，混勻后分裝到 凍存管凍存;此馴化后菌種為缺氧馴化菌種;
(二)、好氧階段馴化：
(9)、當(dāng)樣品經(jīng)過(guò)步驟(5)的第3馴化預(yù)制管A培養(yǎng)完成后，將步驟(2) 冷藏的第1富集管取出并恢復(fù)室溫;待恢復(fù)室溫6-10h后，取5ml接種到上清 液A3中;將接種后的上清液A3放入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 A2中繼續(xù)培養(yǎng);
(10)將接種后的上清液A2放入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 A1中繼續(xù)培養(yǎng);
(11)將接種后的上清液A1放入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)24-48 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 B3中;
(12)、將接種后的上清液B3入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)48-72 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 B2中繼續(xù)培養(yǎng);
(13)、將接種后的上清液B2入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)48-72 小時(shí);培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀5ml接種到上清液 B1中繼續(xù)培養(yǎng);
(14)、將接種后的上清液B1入搖床25-28℃、150-200rpm震蕩培養(yǎng)48-72 小時(shí)，培養(yǎng)完成后靜置30-60min，棄掉30ml上清液，取沉淀1ml，接種到第3 富集管中;
(15)、將第3富集管的管蓋擰緊，平放入搖床28-35℃、150-200rpm震蕩 培養(yǎng)24-48小時(shí);培養(yǎng)后將第3富集管放入4℃保存，或加入4ml無(wú)菌甘油，混 勻后分裝到凍存管凍存;此馴化后菌種為好氧馴化菌種。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和有益效果是：
該試劑盒是通過(guò)本實(shí)驗(yàn)室在全國(guó)大量采集煤焦化廢水樣品，對(duì)廢水成分進(jìn)行 分析，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)配制出了一種可以模擬真實(shí)污水的馴化培養(yǎng)基，并以此為基礎(chǔ) 形成了試劑盒。該馴化培養(yǎng)基具有較廣的適用性，通過(guò)其馴化后的菌種投入到多 個(gè)煤焦化污水樣品后，可以作為高效煤焦化廢水COD處理菌劑或污泥，提高菌種 在廢水中的適應(yīng)能力，其COD降解能力均有所提高，縮短污水處理啟動(dòng)時(shí)間。該 試劑盒可以模擬缺氧、好氧生物法工藝，可以應(yīng)用于煤焦化污水處理菌劑的產(chǎn)品 優(yōu)化，以及污水廠在運(yùn)行前對(duì)污泥進(jìn)行快速馴化。
