乳鐵蛋白是一種鐵結(jié)合型糖蛋白,分子量約為80ku,由一條約700個氨基酸的多肽單鏈和兩條多聚糖側(cè)鏈組成。乳鐵蛋白廣泛分布于哺乳動物的乳汁和其他分泌液中,且具有許多非凡的生理功能:通過結(jié)合并輸送鐵而發(fā)揮補鐵作用;能夠與細菌競爭結(jié)合鐵離子,或破壞細胞膜的通透性,而發(fā)揮抑菌、殺菌作用;此外,還具有抗氧化、抗癌、抗腫瘤,以及免疫調(diào)節(jié)等作用,因此,乳鐵蛋白在食品行業(yè)及醫(yī)藥領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
隨著對乳鐵蛋白結(jié)構(gòu)和功能進行探索的同時,人們也在采用各種方法分離提純?nèi)殍F蛋白,如色譜分離法、膜分離法及磁性分離等,本文將對乳鐵蛋白的分離、純化方法進行總結(jié),為低成本、高效率的乳鐵蛋白工業(yè)化生產(chǎn)工藝開發(fā)提供參考。
膜分離法
超濾是一種基本的膜分離技術(shù),其原理是根據(jù)膜孔徑不同實現(xiàn)不同分子質(zhì)量和分子形狀的大分子物質(zhì)的分離,超濾膜分離設(shè)備操作簡便,易于形成規(guī);I(yè)生產(chǎn),其缺點是產(chǎn)品的純度較低,且膜容易堵塞,需經(jīng)常清洗。乳鐵蛋白分子量為80ku,所以用分子量截留值為50~80ku的超濾膜,可將乳鐵蛋白與乳清中的其他低分子量蛋白,乳糖和無機鹽分開。超濾法分離乳鐵蛋白的工藝,先后經(jīng)截留分子量60ku和100ku的超濾膜分離乳鐵蛋白,其回收率為69%,濃縮倍數(shù)為2.7。針對膜容易堵塞的問題,采用膜分離技術(shù)分離乳鐵蛋白的工藝條件及膜清洗方法,發(fā)現(xiàn)38℃、操作壓力0.19MPa、pH6.9時膜通量和膜效能高,采用水洗10min,濃度為0.5mol/L的NaOH與質(zhì)量分數(shù)為4%的NaCl混合液清洗15min的方式,膜通量恢復(fù)率可以達到95%以上。