色譜分離技術(shù)又稱層析分離技術(shù)或色層分離技術(shù),是一種分離復(fù)雜混合物中各個組分的有效方法。它是利用不同物質(zhì)在由固定相和流動相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù),當(dāng)兩相作相對運(yùn)動時,這些物質(zhì)隨流動相一起運(yùn)動,并在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配,從而使各物質(zhì)達(dá)到分離。
一、色譜種類介紹
色譜有多種,按固定相類型和分離原理可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、親和色譜、大孔吸附樹脂、凝膠色譜、聚焦色譜等。常用的是吸附色譜分離技術(shù)。
吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑(固定相)時,由于吸附劑對不同物質(zhì)具有不同的吸附力而使混合物中各組分分離的方法。此法特別適用于脂溶性成分的分離。被分離的物質(zhì)與吸附劑、洗脫劑共同構(gòu)成吸附層析的三要素,彼此緊密相連。
二、常用吸附劑
常用的極性吸附劑有:硅膠、氧化鋁。硅膠顯弱酸性,適于分離酸性和中性化合物,分離生物堿時需在流動相中加入適量的有機(jī)堿;氧化鋁呈堿性,適于分離生物堿等堿性成分,不宜用于分離有機(jī)酸等酸性成分。極性吸附劑的吸附作用有以下特點。
1、被分離物質(zhì)極性越強(qiáng),吸附力越強(qiáng)。強(qiáng)極性溶質(zhì)將優(yōu)先被吸附。
2、溶劑極性越弱,則吸附劑對溶質(zhì)的吸附能力越強(qiáng)。隨溶劑極性的增強(qiáng),則吸附劑對溶質(zhì)的吸附力將減弱。
3、當(dāng)加入極性較強(qiáng)的溶劑后,先前被硅膠或氧化鋁所吸附的溶質(zhì)可被置換而洗脫出來。
活性炭是常用的非極性吸附劑;钚蕴繉Ψ菢O性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和力,在水中對溶質(zhì)表現(xiàn)出強(qiáng)的吸附能力。從活性炭上洗脫被吸附的物質(zhì)時,溶劑的極性越小,洗脫能力越強(qiáng)。